Roteiro de Aula Prática 3

Roteiro de aula prática 3:

 Enzimas de restrição

1. Enzimas de Restrição

Em 1953 foi descrito um estranho fenômeno no qual a eficiência da replicação de um bacteriófago (vírus de bactérias) dependia da célula hospedeira na qual ele estava inserido. Algum tempo depois percebeu-se que a inabilidade de certos fagos crescerem em determinadas linhagens bacterianas era devido a presença de nucleases altamente específicas que clivavam o seu DNA. Isto pode ser encarado como um sistema de defesa bacteriano que degrada DNA que lhe é estranho (restrição). A bactéria protege seu próprio DNA desta degradação “camuflando-o” através da metilação de algumas bases específicas (modificação). Como consequência, este sistema é frequentemente descrito como fenômeno da restrição/modificação e existe em um grande número de bactérias.

As enzimas de restrição ou endonucleases de restrição são divididas em várias classes, dependendo da estrutura, da atividade e dos sítios de reconhecimento e clivagem. As enzimas do Tipo II, as mais importantes na Tecnologia do DNA Recombinante, são proteínas monoméricas ou diméricas e clivam o DNA no mesmo sítio do seu reconhecimento. O sítio de reconhecimento deste tipo de enzima é normalmente uma sequência palindrômica, isto é, ela tem um eixo de simetria e a sequência de bases de uma fita é a mesma da fita complementar, quando lida na direção oposta (Figura 1).

Figura 1. Os dois tipos de clivagem feitos por enzimas de restrição. As setas indicam os sítios de clivagem e as linhas pontilhadas representam o centro de simetria da sequência.

Estas enzimas reconhecem sequências específicas de 4 a 8 pares de base (pb) na molécula de DNA e fazem dois cortes, um em cada fita. Há 2 tipos distintos de clivagens: a) os dois cortes ocorrem no eixo de simetria da sequência específica, gerando extremidades abruptas, ou b) os cortes são feitos simetricamente, porém, fora do eixo de simetria, gerando extremidades coesivas. Estes dois tipos de clivagens e suas consequências estão mostrados na Figura 1.

Atualmente, mais de 1000 enzimas de restrição já foram identificadas. A nomenclatura desenvolvida foi baseada na abreviação do nome do microrganismo do qual a enzima foi isolada. A primeira letra representa o gênero e as outras duas a espécie, seguido de um algarismo romano (ou outra letra) que indica a ordem da descoberta ou a linhagem da qual ela foi isolada. Por exemplo, a enzima de restrição denominada de EcoRI é purificada de uma Escherichia coli que carrega um fator de transferência de resistência RI, enquanto que a Hind III é isolada da Haemophilus influenzae, linhagem d III.

A Tabela 1 mostra a sequência palindrômica e o local de clivagem de algumas enzimas de restrição. Note que algumas enzimas deixam terminações coesivas enquanto que outras fazem cortes abruptos ou não coesivos.

Tabela 1. Algumas endonucleases de restrição: origem e sítios de clivagem. A seta indica o local de clivagem. Pu e Pi referem-se, respectivamente, a qualquer purina e pirimidina.

O interesse por estas enzimas de restrição aumentou em 1973 quando se percebeu que elas poderiam ser usadas para fragmentar o DNA deixando extremidades de fitas simples de DNA que permitiam a ligação dos fragmentos. Isto significava que a recombinação poderia ser efetuada em tubos de ensaio. Além disto, DNA bacteriano poderia recombinar com DNA humano ou de qualquer outra espécie, abrindo a possibilidade de clonar genes humanos ou isolar proteínas de culturas bacterianas.

Uma importante consequência da especificidade destas enzimas de restrição é que o número de clivagens feito por cada uma delas no DNA de qualquer organismo é definido e permite o isolamento de fragmentos deste DNA. Portanto, cada enzima de restrição gera uma família única de fragmentos quando cliva uma molécula de DNA específica. Enzimas que reconhecem sítios de restrição compostos por 4 pares de bases clivam o DNA em média a cada 256 nucleotídeos (4⁴=256). Aquelas que reconhecem sítios com 6 e 8 pb clivam o DNA em média a cada 4096 e 65536 pb, respectivamente. No entanto, esta média pode sofrer variações significativas, dependendo principalmente da composição de bases do DNA analisado. Por exemplo, a enzima NotI reconhece um sítio de restrição contendo 8pb, incluindo nucleotídeos CpG, que raramente ocorre no DNA de mamíferos.

A família de fragmentos gerados por digestão com enzima de restrição é geralmente detectada pela separação destes fragmentos por eletroforese em gel de agarose. Os fragmentos migram em função de seus pesos moleculares sendo que os menores migram mais rapidamente (Figura 2).

Figura 2. Moléculas de DNA de tamanhos diferentes podem ser separadas por eletroforese. Moléculas menores movem-se mais rapidamente que moléculas maiores, tornando-se portanto separadas em bandas. O DNA é corado com brometo de etídio, uma molécula que fluoresce quando 

          iluminada com luz Ultra Violeta.

Objetivo

Demonstrar como ocorre uma reação de restrição de DNA com a utilização de enzimas de restrição.

Materiais e Métodos

Microtubos de 1,5 mL e 0,2 mL.

Galeria para microtubos.

Pipeta automática.

Ponteiras.

Reagentes: Enzimas de restrição, tampão específico, e DNA.

Banho maria

Digestão total

1 - A um microtubo colocado no gelo adicionar:

5μl do DNA amplificado por PCR

1μl de tampão conveniente (10x conc.)

Água ultra-pura esterilizada q.s.p. 1 μl.

Misturar suavemente agitando no vortex. Manter o microtubo no gelo.

2 - Adicionar 1μl da enzima de restrição e agitar.

As enzimas de restrição são extremamente caras e de grande instabilidade.

Nas preparações comerciais, estas enzimas estão em soluções concentradas de glicerol e mantidas a -20°C. Assim, deve-se ter o maior cuidado ao pipetar estes produtos para evitar desperdícios e desnaturações, de acordo com os seguintes conselhos:

Certificar-se que usa sempre uma ponta nova da micropipeta;

Mergulhar o mínimo possível da ponta no líquido para pipetar;

Manter a solução da enzima o mínimo de tempo possível fora do recipiente refrigerador ou gelo;

Usar o mínimo possível de enzima, garantindo que este volume não contribui com mais de 10% do volume final de reação.

Para calcular a quantidade a usar, consultar a ficha técnica do fabricante. De um modo geral, 1 unidade corresponde à quantidade de enzima necessária para digerir completamente 1μg de DNA do fago lambda, durante 1 hora a 37°C e com o tampão adequado. Para efeitos práticos, considera-se que:

1U digere 1μg DNA/hora

3 - Incubar a mistura à temperatura conveniente de acordo com a enzima (normalmente 37°C) e durante mais ou menos 2 horas.

4 - Analisar os produtos da reação em eletroforese com gel de agarose ou poliacrilamida.

 

Relatório de prática 3 - RFLP (MODELO)

       

  Universidade do Estado da Bahia

  Departamento de Ciências da Vida

  Curso:

  Disciplina: Biologia Molecular e Genética Humana

  Discente:

                       

RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA – RFLP

USO DE ENZIMAS DE RESTRIÇÃO PARA DIAGNÓSTICO

DE ALTERAÇÕES GENÉTICAS

Data

INTRODUÇÃO

Caracterizar a técnica de RFLP, e discorrer sobre as características das enzimas de restrição enzimática

METODOLOGIA

Material e procedimentos utilizados na prática (vide roteiro, já que essa parte foi realizada pela professora)

Descrever a etapa referente a eletroforese em gel de agarose

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Escreva a discussão de acordo com as perguntas abaixo e utilize referências. Não é necessário deixar as perguntas, relate a função dos componentes em texto único.

O RFLP é uma técnica que utiliza enzimas de restrição para digerir sítios palíndromos que por ventura possam existir em uma determinada sequência de um gene em estudo e a partir disso é possível verificar a presença de mutações na sequência e ter um diagnóstico de algumas patologias genéticas mediante observação de um perfil de bandas de DNA em um gel de agarose:

A partir do exemplo utilizado na pratica foi possível visualizar que a enzima de restrição agiu digerindo o fragmento de DNA, anteriormente amplificado por PCR?

Qual era o padrão de bandas dos pacientes e a que conclusão chegamos ao verificar pacientes que eram normais e mutados? (relatar presença/ausência de sitio de restrição)

Qual a função da eletroforese e da luz UV utilizada.

Qual o resultado esperado após a conclusão de um do PCR-RFLP

CONSIDERAÇÕES FINAIS

Comente sobre a importância da técnica

Roteiro de Aula Prática 4: Atividade sobre Sequenciamento Genético

UNIVERSIDADE DO ESTADO DA BAHIA

DISCIPLINA – BIOLOGIA MOLECULAR E GENÉTICA HUMANA

PROFESSOR: JULIANA CÔRTES

ROTEIRO DE PRÁTICA: SEQUENCIAMENTO DE DNA

DOGMA CENTRAL DA BIOLOGIA

Introdução: O DNA dos organismos vivos, é uma molécula muito estável e na maior parte do tempo é auto reparável. Entretanto, ela pode sofrer alterações ao longo do tempo, seja por influências de agentes mutagênicos do meio externo que provocam mudança na sequência de nucleotídeos, seja por deficiência do sistema de reparo que não corrige essas modificações.

Tais alterações, podem modificar a funcionalidade de um gene, levando a produção de proteínas alteradas, ou até mesmo suprimindo sua produção.

Atualmente, técnicas modernas da Biologia molecular como sequenciamento de DNA, podem orientar os pesquisadores na busca dessas alterações e com isso é possível determinar se aquela alteração na sequência de DNA é patológica ou não.

Objetivo: Identificar a partir de observações em imagem de eletroferograma e de sequências de DNA originadas através da técnica de sequenciamento mutações na sequência de DNA

Metodologia: Nas imagens abaixo, você deverá buscar alterações entre a sequência de “homo sapiens” e a sequencia chamada placa 168 (que se refere a uma sequencia amplificada de DNA de um indivíduo). Note que o programa deixa um ponto onde não houve alteração e mantém uma letra onde a mutação ocorreu. Observe essas alterações e anote os nucleotídeos que estão pareados. Primeiro, o que está na sequência “homo sapiens” e depois de uma seta, a letra que está na sequência da “placa 168”. Ex.: TàA

Após anotar todas as alterações, busque na literatura: o tipo de mutação que você visualizou  e identifique quais as consequências que isso pode trazer para a produção e funcionamento da proteína. Você conseguiria concluir se essa mutação é patológica para o paciente? Justifique.

 

LIVROS - REFERÊNCIAS - BIOLOGIA MOLECULAR - GENÉTICA

As edições encontradas na Biblioteca podem variar em relação a estas que estão na lista, mas os títulos e autores são os mesmos. Para a primeira parte da disciplina (Biomol), o mais completo está grifado em vermelho e os mais didáticos para estudar, em verde. Os demais são adequados para a 2ª parte da disciplina (Genética humana).

Referencias Bibliográficas

BORGES-OSÓRIO, Maria Regina; ROBINSON, Wance Miriam. Genética humana. 2. ed Porto Alegre: Artmed, 2002. 459 p.

BRUCE, Alberts e col. Biologia Molecular da Célula 4ª ed. Porto Alegre:Artmed, 2004.

GRIFFITHS, Anthony J. F. Introdução à genética. 6. ed Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, c1998 856

GUERRA, Marcelo dos Santos. Introdução a citogenética geral. Rio de Janeiro: Ed. Guanabara, c1988. 142p

LEWIN, Benjamin. Genes VII. Porto Alegre: Artmed Editora, 2006 955p.

PIERCE, Benjamin A. Genética: um enfoque conceitual. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2004

PURVES, William K. Vida: a ciência da biologia; volume I: célula e hereditariedade. 6. ed. Porto Alegre, RS: Artmed, 2005. 377p.

STRACHAN, Tom; READ, Andrew P. Genética molecular humana. 4. ed. Porto Alegre: Artmed, 2013, 576p.

THOMPSON, James S; THOMPSON, Margaret W. Genética médica. 3. ed Rio de Janeiro: Interamericana, 1981. 365p

                            ATIVIDADE SOBRE CASOS CLÍNICOS EM GENÉTICA HUMANA

Analise os casos clínicos abaixo e responda as questões referentes a cada um deles (as respostas de todos os casos devem ser entregues nos dias 07 e 08 de novembro). Na data sugerida para a apresentação, o grupo deverá apresentar um dos casos a ser definido por sorteio.

Caso 1

História e Achados físicos

P. S., uma mulher saudável de 30 anos, estava na 27ª semana de gestação de seu primeiro filho. Um ultrassom fetal na 26ª semana de gestação identificou um feto feminino com macrocefalia a rizomelia. O marido de P. S. tinha 45 anos de idade e era saudável. Ele tinha três filhos saudáveis de um casamento anterior. Nenhum dos genitores tinha uma história familiar de defeitos de nascimento ou distúrbios genéticos. A menina nasceu após 38 semanas de gestação por cesariana. Ela apresentava as características que incluíam bossa frontal, megaencefalia, hipoplasia da face média, cifose lombar, extensão limitada do cotovelo, rizomelia, mãos em tridente, braquidactilia e hipotonia. Compatível com suas características físicas, os testes de DNA identificaram uma mutação G1138A no gene de receptor 3 de fator de crescimento de fibroblastos (FGFR3).

Pelos achados clínicos e mutação identificada, qual o distúrbio genético presente na filha de P.S.? Qual a influência do defeito genético (mutação em FGFR3) para os achados físicos? Existem outras vias metabólicas que são influenciadas pelo gene em questão? Qual o teste genético pode ser adequado para o diagnóstico?

Caso 2

História e Achados Físicos

Pela segunda vez em 6 meses, um casal do Caribe trouxe sua filha de 24 meses de idade, C.W., ao departamento de emergência por ela não conseguir se sustentar sobre os pés. Não havia história de febre, infecção ou trauma e, sob outros aspectos, sua história médica era normal. Os achados do exame físico eram normais, exceto pela ponta do baço palpável e os pés inchados. Seus pés eram muito sensíveis à palpação, e ela se recusava a sustentar seu peso. Ambos os pais tinham irmãos que morreram na infância por infecções e outros podiam ter tido alguma doença genética. Em vista desta história e do inchaço doloroso e recorrente de seus pés, os médicos realizaram teste genético em C.W. para avaliar a presença da alteração no gene da Beta globina. Foi constatada a alteração.

Pelos achados clínicos e mutação identificada, qual o distúrbio genético presente em C. W.? Qual a influência do defeito genético (mutação no gene da Hemoglobina) para os achados clínicos? O fato da família residir no Caribe tem alguma influência sobre a origem da doença e nas outras mortes ocorridas entre os parentes?  Existem outras vias metabólicas que são influenciadas pelo gene em questão? Qual o teste genético se adequa ao diagnóstico?

Caso 3

Histórias e Achados Físicos

S. M., uma mulher de 27 anos antes saudável, foi encaminhada a uma clínica de genética do câncer por seu ginecologista após ter diagnosticado um câncer de mama. Ela estava preocupada com o risco dos filhos desenvolverem câncer e com o seu risco de desenvolver câncer ovariano. Sua mãe, duas tias maternas e o avô materno tinham câncer de mama. Sua mãe também tinha tido câncer ovariano. Os achados do exame físico de S. M. eram marcantes apenas por uma cicatriz em seu seio direito. O consultor genético explicou que a história familiar de câncer de mama era indicativa de uma predisposição hereditária. Com base na discussão que seguiu de prognóstico e riscos de recorrência, S. M. pediu que suas filhas de 6 e 7 anos fossem testadas. O consultor genético explicou que a decisão de fazer o teste genético seria melhor se fosse deixada para quando as crianças fossem maduras o suficiente para decidir sobre a utilidade de tais testes. Cinco parentes adultos decidiram fazer o teste preditivo, e descobriu-se que quatro eram portadores da mutação. Uma destas quatro pessoas fez uma mastectomia bilateral profilática e a outra fez uma salpingo-ooforectomia bilateral profilática.

Nesse caso, que parece ser uma predisposição hereditária ao câncer, quais os prováveis genes envolvidos na origem do câncer? Tais genes se comportam como oncogenes ou supressores tumorais? A partir dessa resposta, como age a proteína expressa por este gene e por que um defeito nela da origem ao câncer? Existe outras proteínas associadas que participam da via metabólica junto a este gene? Como agem? Qual o teste genético se adequa ao diagnóstico?

Caso 4

Histórias e Achados Físicos

Em um calmo final de tarde de verão, L. M., um menino de 5 anos antes saudável, apresentou-se na emergência com febre, pálido, com taquicardia, taquipnéia e respondendo minimamente. Sob outros aspectos, os achados de seu exame físico eram normais. Na manhã anterior à apresentação, ele estava com boa saúde, mas durante a tarde desenvolveu dor abdominal, dor de cabeça e febre. No final da tarde ele estava com taquipnéia e incoerente ele não tinha ingerido nenhuma medicação ou toxina conhecida e os resultados da triagem toxicológica da urina foram negativos. Os resultados de outros testes laboratoriais mostraram uma intensa hemólise não-imune intravascular e hemoglobinúria após a ressucitação, L. M. foi internado no hospital. A hemólise resolveu-se sem outra intervenção. L. M. era de origem grega. Seus pais não tinham conhecimento de história familiar de hemólise, embora sua mãe tivesse alguns primos na Europa com um “problema sanguíneo”. Uma investigação posterior revelou que, na manhã anterior a internação, L. M. tinha comido feijões de fava no jardim enquanto sua mãe estava trabalhando no quintal. O médico explicou aos genitores que L. M. provavelmente tinha alguma deficiência enzimática e por causa disso tinha ficado doente após ingerir fava. Os testes de dosagem enzimática de L. M. confirmou que tinha deficiência de Glicose-6-Fosfato Desidrogenase. Os genitores foram informados quanto ao risco de L. M. fazer uma hemólise aguda após a exposição a algumas drogas e toxinas e receberam uma lista de compostos que L. M. deveria evitar. 

A deficiência está associada a que gene? E em que cromossomo está localizado? Qual o tipo de herança? Qual a função da enzima Glicose-6-Fosfato Desidrogenase e por que motivo a deficiência desta enzima leva ao quadro clínico em questão? Quais compostos devem ser evitados pelo paciente e porquê? Qual o teste genético se adequa ao diagnóstico?

Caso 5

Histórias e Achados Físicos

A.Y. era um menino de 6 anos de idade encaminhado por um pequeno retardo de desenvolvimento. Ele tinha dificuldade para subir escadas, correr e participar de atividades físicas vigorosas. Ele tinha tanto a força quanto a resistência diminuídas. Seus genitores, dois irmãos e uma irmã eram todos saudáveis. Nenhum outro membro da família era similarmente afetado. Ao exame, ele tinha dificuldade para subir na mesa de exame, um sinal de Gowers (uma sequência de manobras para se levantar do chão, fraqueza proximal, um andar oscilante, tendões calcâneos rígidos e aumento da panturrilha. Seu nível de creatina cinase (CK) estava 50 vezes maior que o normal. Em função da história, dos achados do exame físico e do nível fortemente elevado de CK sugerirem uma miopatia, A. Y. foi encaminhado a uma clínica de neurogenética para uma melhor avaliação. Os resultados de sua biópsia muscular mostraram uma acentuada variação no tamanho das fibras musculares, necrose de fibras, proliferação de tecido gorduroso e conjuntivo e ausência de coloração para distrofina. Com base nestes resultados, a condição de A.Y. foi testado quanto alterações do gene de distrofina. Observou-se que ele tinha uma deleção dos exons 45 a 48. Os testes subsequentes mostraram que sua mãe era portadora. A família foi informada de que o risco de filhos afetados era de 50%, o risco de filhas afetadas era baixo, mas dependia de desvios de inativação do cromossomo que contém o gene, e o risco de filhas portadoras era de 50%. Como sua condição de portadora a colocava em alto risco de complicações cardíacas, a mãe foi encaminhada para uma avaliação cardíaca. 

Qual a doença do caso em questão? Qual a função do gene mutado e porque a sua alteração leva ao quadro clínico? Qual o tipo de herança e qual o cromossomo afetado? Por que a doença é mais comum em meninos? Qual o teste genético se adequa ao diagnóstico?

Caso 6

História e Achados Físicos 

M. P., um homem de 45 anos de idade, apresentou-se inicialmente com um declínio de memória e concentração. À medida que sua função intelectual se deteriorou durante o ano seguinte, ele desenvolveu movimentos involuntários nos dedos e artelhos, bem como distorções faciais. Ele estava ciente de sua condição e ficou deprimido. Ele havia sido saudável antes e não tinha uma história de nenhum parente afetado de modo semelhante Seus genitores haviam morrido na década dos 40 anos em um acidente de automóvel. M. P. tinha uma filha saudável. Após uma extensa avaliação, o neurologista diagnosticou a condição de M.P. O diagnóstico foi confirmado por urna análise de DNA que mostrou 43 repetições CAG em um dos alelos do gene HTT no cromossomo 4 (padrão normal, < 26). Os testes pré-sintomáticos na filha de M. P. mostraram que ela também tinha herdado o alelo mutante. Ambos receberam ampla informação. 

Qual a doença em questão, Qual o gene afetada e por qual razão o excesso de repetições CAG levam ao aparecimento da doença? Por que ocorre um sério comprometimento neurológico somente na vida adulta? Qual o tipo de herança? Qual o teste genético se adequa ao diagnóstico?

Algumas pessoas que apresentam casos na família preferem não realizar o diagnóstico. Qual seria a razão para alguém optar em não saber se é portador da doença?

Caso 7

História e Achados Físicos 

J.B., uma menina de 2 anos, foi encaminhada a clínica pediátrica para avaliação do pouco crescimento Durante a lactância, J. B. tinha tido diarreia e colite que se resolveram quando uma fórmula elementar substituiu sua formula padrão. Ela desenvolveu fezes malcheirosas, contendo partículas de alimento, quando alimentos
comuns foram adicionados a sua dieta. Durante seu segundo ano, J. B. cresceu pouco, desenvolveu uma tosse crônica e teve frequentes infecções respiratórias. Ninguém mais na família tinha pouco crescimento, distúrbios de alimentação ou doenças pulmonares. No exame físico, o peso de J. B. e sua altura estavam abaixo do 3º percentil e a circunferência de sua cabeça, no 10° percentil. Ela apresentava um grave exantema causado pela fralda, ruídos brônquicos difusos e leve baqueteamento dos dedos. Sob outros aspectos, as achados de seu exame eram normais. Após uma breve discussão de algumas possíveis causas da doença de J.B., o pediatra solicitou vários testes, incluindo um teste para o nível de cloreto no suor. O nível de cloreto no suor era de 75 mmol/L. (Padrão normal, 40 mnol/L; indeterminado, de 40 a 60 mmol/L). Com base neste resultado e no curso clínico, o pediatra diagnosticou a condição de J.B. Os genitores e J. B. foram encaminhados a uma clínica de genética para outras informações e tratamento. 

Qual a doença em questão, Qual o gene afetado e por qual razão a alteração leva ao aparecimento da doença? A heterogeneidade alélica é uma característica peculiar da doença, quais as implicações disso? Qual o tipo de herança? Qual o teste genético se adequa ao diagnóstico?

Caso 8

História e Achados Físicos 

J T. nasceu na 38ª semana de gestação, após uma gravidez e parto sem complicações. Ele era o segundo filho de genitores não-consanguíneos. Logo após o nascimento, seus genitores e as enfermeiras notaram que J. T. era hipotônico e alimentava-se pouco. Seus genitores e a irmã mais velha estavam com boa saúde. J.T. não tinha uma história familiar de distúrbios neuromusculares, de desenvolvimento, genéticos ou de alimentação. A revisão do registro médico do paciente não revelou uma história de convulsões manifestas, danos hipóxicos, infecção, anomalias cardíacas ou anomalias de glicose ou eletrólitos sanguíneo. Ao exame, J. T. não tinha sofrimento respiratório ou características dismórficas, exceto uma bolsa escrotal hipoplásica e criptorquidismo. Seu peso e sua altura eram apropriados para a idade gestacional. Ele era gravemente hipotônico, com letargia, choro fraco, reflexos diminuídos e pouca sucção. A avaliação subsequente incluiu testes para infecções congênitas, imagens cerebrais de ressonância magnética, nível de amônia sanguínea e avaliação de ácidos orgânicos na urina, triagem de aminoácidos e avaliação de hipotireoidismo. Um teste genético identificou uma deleção no cromossomo 15 (15q11- 13). Os resultados dos demais testes foram normais. Após várias explicações e reflexão, os genitores de J.T. decidiram que eram incapazes de cuidar de uma criança incapacitada e deram J. T. para adoção.

Qual a doença em questão, Por que a alteração leva ao aparecimento da doença?

Uma outra doença está associada a uma alteração semelhante na mesma posição do mesmo cromossomo, e isso depende de qual genitor advém a mutação aos filhos, se o pai ou a mãe. Uma vez que as duas doenças podem ter duas (ou mais) razões genéticas específicas, explique quais as manifestações genéticas mais comuns para a manifestação da doença e como ocorre a herança da alteração. Qual o teste genético se adequa ao diagnóstico?